YMC-Pack Pro C18 RS系列在制造过程中进行了严格的质量管理,保证能为客户提供最高品质的产品。为了使供给您的色谱柱最大地发挥其性能并能够长时间使用,请认真阅读YMC-Pack Pro C18 RS说明书正确使用。
一、YMC-Pack Pro C18 RS是一款具有高分离度,高耐久性的复合键合型高含碳量的ODS柱。其采用金属杂质含量极少的硅胶基质进行键合,与普通的色谱柱相比,本款色谱柱进行了更高度的端基封尾处理,可用于包括碱性化合物在内的,广范围的各类化合物的分离。
二、出厂时柱内的保存溶剂
为乙腈/水(60/40)。如果色谱柱需要长期保存,请置换为此溶剂。
三、流动相(洗脱液)
a、从水性溶剂到非水性溶剂都可使用,但在极性极端不同的溶剂之间进行反复置换后,分析柱性能可能会降低。
可以使用的有机溶剂为乙腈,甲醇,四氢呋喃(THF)等。
b、使用时请按照色谱柱标签上的箭头方向来进行通液操作。
c、通常流动相的pH值请在pH1.0 ~ 10.0 范围内进行调制。
d、另外,在pH值临界点附近,会有由于温度,流动相成分等条件使得色谱柱的寿命缩短。在pH值临界点附近,请使用含有10%以上的有机溶剂的洗脱液。特别是pH9以上时,请使用含50%以上的有机溶剂的洗脱液。
四、流动相(洗脱液)的置换
Pro C18 RS与一般C18柱相比,由于采用了疏水性较大的填料,因此置换成有机溶剂比率较低的流动相,以及平衡化时可能会出现困难的现象。使用时请注意以下几点。
a、如需置换流动相,请注意有机溶剂之间的混合性和盐的析出。
b、甲醇/水的洗脱液中甲醇的组成比在10%以下时,保留时间的再现重复性可能不易得到。乙腈/水的洗脱液不会有此问题。
c、改变洗脱液中的有机溶剂种类,从甲醇/水置换成乙腈/水时,乙腈的组成比在20%以下时,保留时间和峰形可能会出现异常。在这种情况下,请先用60%的乙腈水溶液进行置换后,再置换成洗脱液。
五、色谱柱的清洗(一般方法)
a、洗脱液中不含缓冲液或盐类物质的情况下,请提高构成洗脱液的有机溶剂的浓度,清洗柱内保留的较大的物质,可用100%的有机溶剂进行清洗。特别是当脂溶性较高的成分被吸附在柱内的时,添加THF,有时也可取得比较好的效果。
b、洗脱液中含有缓冲液或盐类物质的情况下,先用不含此类物质的水/有机溶剂混合液(与洗脱液同等配比)置换后,再使用上述方法进行清洗。如果缓冲液或盐的浓度为100mM左右,可直接用60%的乙腈水溶液等来进行置换。
c、在pH值临界点附近使用后,如只用水来清洗,可能会引起色谱柱的劣化。请置换成前面所提到的水/有机溶剂混合液或60%的乙腈水溶液。
d、如果蛋白质或多糖类等高分子化合物附着在柱内,一般很难用清洗来去除附着物。如使用含有此类物质或杂质较多的样品进行分离时,我们推荐对样品进行预处理,或使用保护住。
六、其他的使用环境
a、柱压在柱长为150mm以下时为20MPa左右,250mm时25MPa为其上限基准。但对于内径为10mm以上的半制备柱则以10MPa左右为上限基准的参考值。
b、反复进样品后,柱压可能会升高。如果发生这种情况,请使用YMC Duo-filter(0.2μm)等对样品进行预处理过滤。另外对于易造成筛板堵塞的样品请用柱前滤网(XRPRCS01)来进行处理。
c、色谱柱的使用温度上限为50℃,但由于流动相的pH值等因素会影响到色谱柱的寿命,所以通常情况下请在20℃~ 40℃范围内使用。