1. 本公司在YMC-Pack 系列反相色谱柱的制造过程中进行了严格的质量管理,保证能为客户提供最高品质的产品。为了使供给您的色谱柱最大地发挥其性能并能够长时间地被正确使用,请认真阅读本产品的使用说明书。
2.色谱柱的连接型号在色谱柱标签上所记载的号码后面的( )内有标记符号表示。
W:waters 的互换连接样式
3.出厂时柱内的保存溶剂
在产品盒内的附件COLUMN INSPECTION REPORT(检测报告)中有标示,如需长期保存,请置换为此溶剂。
4.流动相(洗脱液)
・ 如需要替换流动相,请注意有机溶剂之间的混合性和盐的析出现象。
・ 从水溶性溶剂到非水溶性溶剂都可使用,但在极性极端不同的溶剂之间进行反复置换后,分析柱性能可能会有所降低。通常可以使用的有机溶剂为乙腈、甲醇、四氢呋喃(THF)等。在使用THF 时,请注意PEEK 管材等的耐溶剂性。
・ CN 色谱柱在正相,反相上都能使用。但在使用过程中请固定一种模式。使用正相模式时,开始请使用异丙醇等将柱内的溶剂进行置换(置换时,请将流量设定在压力为15Mpa 以下)。
・ 使用时请按照色谱柱标签上的箭头方向来进行通液操作。
・ 流动相的pH 值请调制在2.0 到7.5 之间。但PROTEIN-RP 柱可在1.5 到7.5 的范围中使用。
・ 在pH 值临界点附近,请使用含有10%以上的有机溶剂的流动相。在pH 值临界点附近,会有由于温度,流动相等条件而造成色谱柱寿命缩短的现象发生。
5. 色谱柱的清洗(一般方法)
・ 洗脱液中不含有缓冲液或盐类物质的情况下,提高组成洗脱液的有机溶剂的浓度,来清洗柱内残留的较大的物质,可以用100%的有机溶剂。特别是脂溶性较高的成分被吸附在柱内的情况下,如果添加THF,有时可以取得比较好的效果。
・ 洗脱液中含有缓冲液或盐类物质的情况下,先将不含此类物质的水/有机溶剂混合液(与洗脱液同等配比)置换后,与先前同样的方式进行清洗。如果缓冲液或者盐分类是50mM的情况,请用60%的乙腈水溶液来直接置换。
・ CN 柱使用非水性流动相进行正相分离中,当推测其极性成分出现柱内吸附时,请用异丙醇等来进行清洗。
・ 在pH 值临界点附近使用后,如只用水来清洗,可能会引起色谱柱的劣化。请置换成前面所提到的水/有机溶剂混合液或60%的乙腈水溶液。
・ 如果蛋白质或多糖类等高分子化合物附着在柱内,一般很难用清洗来去除附着物。如使用含有此类物质或杂质较多的样品进行分离时,请对样品进行预处理。
6. 其他的使用环境
・ 柱压在柱长为150mm以下是20MPa 左右,柱长为250mm时,请把25MPa 左右设为其上限。但内径为10mm以上的半制备色谱柱的压力以10MPa 左右为上限基准值。
・ 反复进样品后,柱压可能会升高。如果发生这种情况,请使用YMC Duo-filter 对样品进行预处理过滤。另外对于易造成筛板堵塞的样品请使用预柱过滤网(XRPRCS02)来进行处理。
・ 色谱柱的使用温度上限为50℃,但是,由于流动相的PH 值等因素会影响到色谱柱的寿命,所以通常情况下请在20℃~ 40℃范围内使用。
7.参考资料: