色谱柱活化是指新装色谱柱在使用前要进行老化处理,其目的是取出残留的溶剂、水分和低沸点杂质,同时也使固定液在载体表面形成均匀的膜。
色谱柱活化的一般步骤:
1、安装以乙腈(反相)或乙腈正己烷(1:99)正相冲洗整个系统。
2、检查流路系统有无气泡,气泡会造成色谱柱填料间隙而影响色谱柱的分离效能。
3 按色谱柱上标明方向,接上色谱柱,起始流速为0.1-0.2ml/min逐渐大,1.0ml/min,所需试剂为10倍柱体积,暂停系统,更换流动相,起始流速为0.1-0.2,逐渐增大,直到系统平衡。
色谱柱的使用寿命,除了与所分析的样品和流动相及使用频率有关外,最主要的是与日常的维护密切相关。使用寿命主要是根据柱效和柱压两个指标来衡量,如果一根色谱柱的柱效太低或柱压太高,通常被认为该色谱柱的使用寿命已经结束。因此,延长色谱柱使用寿命的关键是,消除引起柱效下降和柱压升高的因素。
色谱柱的日常维护方法;
1、流动相的pH应在色谱柱所规定使用范围内
2、使用保护住和流路过滤器
3、正确使用缓冲盐溶液
4、防止强保留物质存留在色谱柱中